產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品名稱：人核糖核酸酶P基因PCR測定試劑盒

產(chǎn)品貨號：LZ-P1762

規(guī)格：50T

分類：PCR檢測試劑盒

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運輸：低溫、避光。

有效期：一年

如何進行 PCR 實驗？

一、準備實驗材料（1）DNA模板：包含你想要復(fù)制的DNA區(qū)域。上海（2）引物：短的單鏈DNA片段，用于指導(dǎo)DNA合成的起始位置。（3）DNA聚合酶：一種酶，用于合成DNA。（4）四種脫氧核苷酸（dNTPs）：DNA的構(gòu)建塊。（5）緩沖液：提供適宜的反應(yīng)環(huán)境。（6）鎂離子或其它必需的離子：通常作為DNA聚合酶的輔助因子。二、設(shè)定反應(yīng)混合物將所有材料混合在微量離心管中?；旌衔锏目傮w積通常在20-50微升之間。

1. 3. PCR程序（1）將混合物放入PCR機（熱循環(huán)儀）中，并設(shè)定程序。PCR程序通常包括以下階段：（2）初次變性：加熱至94-98°C，持續(xù)幾分鐘，使DNA雙鏈解開成單鏈。（3）循環(huán)步驟（通常進行30-40次循環(huán)）：（4）變性階段：加熱至94-98°C，持續(xù)20-30秒，使DNA雙鏈解開。（5）退火階段：降溫至50-65°C，持續(xù)20-40秒，允許引物與模板DNA結(jié)合。（6）延伸階段：加熱至72°C，持續(xù)1分鐘每1千個堿基，以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。（7）后延伸：在72°C下持續(xù)5-10分鐘，確保所有可用的DNA模板都被復(fù)制。（8）保持階段：將溫度降至4-15°C，直到用戶準備取出樣品。

實驗步驟：

一．樣品制備

1．PCR擴增并檢測。根據(jù)不同的引物挑選適合的退火溫度進行PCR擴增。擴增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測，上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。

2．PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液（變性緩沖液，同《分子克隆》中的測序緩沖液），然后在緩沖液中央加入PCR擴增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗，擴增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul，效果很好加0.5ul，如果不太好就適當增加1.5、2或3不等，同時加大上樣緩沖液的量，比如加3ul的PCR產(chǎn)物，緩沖液加到8ul變性效果更好。

3．PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進行離心，使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘，立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min，以免變性的產(chǎn)物復(fù)性。

PCR實驗的基本步驟：

DNA聚合酶是實驗室中常用的生物學(xué)酶之一，在PCR實驗中具有重要的作用。實驗室常用的DNA聚合酶，包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。

一Taq聚合酶：

人核糖核酸酶P基因Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶，在分子生物學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性，可以在高溫條件下保持活性，這是由于其來源于熱液生物，能夠存活和正常活動于高溫環(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）中起到關(guān)鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈，因此在PCR中用于擴增目標DNA片段。然而，Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性，導(dǎo)致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現(xiàn)額外的腺嘌呤堿基。因此，在某些應(yīng)用中，需要使用具有外切酶活性的聚合酶。

二、Pfu聚合酶：

Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比，Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色，其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應(yīng)的可靠性和準確性。此外，Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性，可以修復(fù)并糾正PCR反應(yīng)中的腺嘌呤堿基誤配，有效防止誤差累積。因此，Pfu聚合酶適用于需要高度準確的PCR擴增和DNA測序。

三、PCR檢測試劑盒Tth聚合酶：

Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同，Tth聚合酶具有熱活性反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶活性，可以將RNA模板合成相應(yīng)的DNA鏈。因此，Tth聚合酶在逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）中得到廣泛應(yīng)用，用于將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA，并通過增加熱活性酶來實現(xiàn)PCR擴增。此外，Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性，可用于修復(fù)和校正PCR產(chǎn)物的末端。

10-羥基癸烯酸 10-xy7noxy-2-decenoic acid 分 子 量：186.2500 CAS編號：14113-05-4 分子式：C10H18O3 別　　名：王漿酸;10-羥基-Δ2-葵烯酸;Ω-羥基-Δ2-葵烯酸 基本用途：含量測定。

貝母 Fritillaria thunbergii Mig Peimisine 貝母心 19773-24-1 C27H41NO3 香紫蘇醇(5654

供鑒別用柳穿魚黃素111815-201001常溫，避光20mg

metxazolamide甲氮酰胺標準品554-57-4 500mg

鉤藤 Uncaria rhynchopylla (Miq.) Jacks. Isocorynoxeine 異去氫鉤藤堿 51014-29-0 C22H26N2O4 ≥98%

大黑附子Homalomena gigantea Oplopanone 10alpha-羥基日本刺參萜-4-酮 1911-78-0 C15H26O2 ≥95%

維生速A醋Vitcmincccid20mg/支

肉豆蔻Myristica fragrans Hot imyristin 甘油三肉豆蔻酸酯 555-45-3 C45H86O6 標準黏度液1 0056

含量測定輕臭樟柳堿100399-200601常溫，避光100mg

二類殘留溶劑-六氫化標準品108-87-2 (Me... 1.2ml×3ampules

66-84-2 葡萄糖胺鹽酸鹽標準品 200mg

豬胰島速原Porcineproinsulin2.2μg/支

16-Deoxysaikogenin F 57475-62-4

metxocarbamol 美索巴莫標準品532-03-6 200mg美索巴莫標準品

羅漢果黃素 156980-60-8 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

人核糖核酸酶P基因PCR測定試劑盒小鼠Sesin小鼠3蛋白(SESN3)ELISA試劑盒 ，英文名： SESN3 ELISA Kit

人凝血酶受體()ELISA檢測試劑盒Humahrombieceptor,ELISAKit 96T/48T

大鼠花生四烯酸(AA)試劑盒 Rat Arachidonic Acid,AA ELISA Kit

英文名稱RatSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit大鼠5-羥色(5-HT)規(guī)格：96T/48T

裂解液Ⅹ真菌/酵母細胞活性化蛋白制備

ELISAKitMAdCAM-1人黏???